色譜峰寬的構(gòu)成

       色譜分析時(shí)經(jīng)常會(huì)有先出來(lái)的峰就窄，后出來(lái)的就寬的情況。色譜峰寬是由很多因素構(gòu)成的，每個(gè)因素影響程度不同，造成的結(jié)果也不同，誰(shuí)的影響力大，就主要顯示誰(shuí)的作用結(jié)果。那么色譜峰寬，到底由哪幾部分構(gòu)成？

    色譜峰寬由兩部分構(gòu)成： 一、對(duì)稱峰寬。二、拖尾峰寬。所謂對(duì)稱峰寬，就是指這種峰寬不會(huì)造成峰型不對(duì)稱，不會(huì)出現(xiàn)拖尾前伸。而拖尾峰寬，就是指這個(gè)峰寬構(gòu)成，會(huì)導(dǎo)致峰形狀變的不對(duì)稱。我們首先要研究的是對(duì)稱峰寬，這個(gè)導(dǎo)致了峰寬的主要構(gòu)成。

一、對(duì)稱峰寬。

對(duì)稱峰寬主要包括兩部分：1、塔板理論正常展寬。2、正常進(jìn)樣峰展寬。

1、塔板理論正常展寬

    根據(jù)塔板理論，進(jìn)樣時(shí)處于0號(hào)塔板的組分，離開色譜柱時(shí)已經(jīng)占據(jù)了很多塊塔板，導(dǎo)致峰寬加大，并形成正態(tài)分布的峰型。

2、正常的進(jìn)樣展寬

    根據(jù)塔板理論，樣品進(jìn)樣時(shí)都停留在0號(hào)塔板上，但這是不可能的。因?yàn)橐粋€(gè)塔板的體積是如此的小，以至于根本放不下襯管里面哪怕是經(jīng)過(guò)分流之后的樣品。比如你的襯管有0.5ml，分流比50倍，那么進(jìn)入色譜柱的體積大約有10立方毫米。但你的毛細(xì)管柱內(nèi)徑就算是0.53mm的，可是這是直徑啊，算下來(lái)，這些樣品都進(jìn)去，也要占據(jù)大約50mm長(zhǎng)的柱子。也就是說(shuō)，0號(hào)塔板放不下，要放到。。。。算你的柱子是50m，那么就是柱效的千分之一了，毛細(xì)管柱，算你10萬(wàn)塊板，那么也是100塊塔板了。

   那么說(shuō)，進(jìn)樣寬度就是100塊塔板了？錯(cuò)。進(jìn)樣寬度沒(méi)有這么大，只有這個(gè)數(shù)值除以分配比k之后的塔板數(shù)。為什么要除以分配比？因?yàn)樯V柱固定相可以溶解很多樣品中待測(cè)組分，所以待測(cè)組分在這100塊板上濃度不同，只有前面1/k的塔板上濃度比較高。

1、為什么毛細(xì)管柱，所有色譜峰基本一般寬？

答：因?yàn)槊?xì)管柱內(nèi)徑小，樣品進(jìn)樣正常展寬很大，而且因?yàn)橹剩ɡ碚撍鍞?shù)）高，所以塔板理論展寬與柱效率的平方根成反比，這個(gè)很小，所以峰寬主要由進(jìn)樣展寬構(gòu)成，而組分的進(jìn)樣展寬在色譜柱內(nèi)前進(jìn)時(shí)保持不變，所以從柱尾流出來(lái)的時(shí)候，寬度主要由進(jìn)樣展寬決定，而所有組分的進(jìn)樣展寬基本一致，因此都是一樣寬。

 2、為什么填充柱色譜，先出峰很窄，后出峰很寬？

答：因?yàn)樘畛渲膬?nèi)徑大，樣品進(jìn)樣正常展寬很小，所以峰寬主要是踏板理論展寬構(gòu)成，而根據(jù)踏板理論，峰寬與保留時(shí)間成正比，所以后出的峰比較寬。

3、為什么會(huì)有溶劑聚焦現(xiàn)象？

答：因?yàn)槿軇┚劢故侵涑跏紲囟缺热軇┓悬c(diǎn)低，導(dǎo)致溶劑在柱頭冷凝成液體，相當(dāng)于增加了一層溶解度很大的固定液，導(dǎo)致分配比k增加很多倍，這樣進(jìn)樣寬度就減小很多倍，所以色譜峰就窄了。

4、為什么有的難分離組分用薄膜柱子或者固定液涂澤量少的柱子來(lái)分析分離度大，而更多的組分用厚膜或者固定液涂澤量大的分離度高？

答：分離度等于保留時(shí)間之差除以峰寬之和的一半。根據(jù)速率理論，薄膜的柱子傳質(zhì)阻力小，所以柱效率高，分離度高。但根據(jù)進(jìn)樣寬度，厚膜柱子分配比k大，所以進(jìn)樣展寬小，色譜峰寬小，因此分離度高。

     一般來(lái)說(shuō)，高含量組分用厚膜柱子好，可以減少進(jìn)樣寬度，增加分離度；低含量組分用厚膜柱子好，因?yàn)楹衲ぶ釉试S更大的進(jìn)樣量，檢出限高。啊？那么薄膜柱子就沒(méi)存在的必要了？錯(cuò)。薄膜柱子柱流失小的多，而且對(duì)于含量不大不小的樣品，也有更好的分離度。

來(lái)源于儀器信息網(wǎng)