頂空氣相色譜法測(cè)定藥物中的有機(jī)溶劑殘留

  采用氣相色譜儀加FID檢測(cè)器和頂空進(jìn)樣器測(cè)定原料藥中殘留量有機(jī)溶劑，是一種普遍采用的、穩(wěn)定分析方法，同時(shí)具有較好的重現(xiàn)性和回收率。

  頂空氣相色譜法的原理是：利用被測(cè)樣品（氣-液和氣-固）加熱平衡后，取其揮發(fā)氣體部分進(jìn)人氣相色譜儀。它于分析易揮發(fā)的微量成分，如對(duì)甲醇、乙醇等許多易揮發(fā)的有機(jī)溶劑類；不同季節(jié)的花香氣、香水類，帶有易揮發(fā)成分的中草藥類；特殊氣味的蔬菜和調(diào)味品類等均可用它進(jìn)行定量分析。頂空氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法是用于對(duì)未知的揮發(fā)成分進(jìn)行定性分析的方法。

儀器與試劑

1.儀器：氣相色譜儀加FID檢測(cè)器；弱極性或中等極性氣相色譜柱；1-5uL微量注射器。

2.試劑：甲醇；乙腈；二氯甲烷；三氯甲烷；丙酮；正丙醇（均為分析純）；地塞米松磷酸鈉原料藥。

氣相色譜分析步驟

1.地塞米松磷酸鈉中丙酮的檢測(cè)

1.1溶液制備與測(cè)定

精密量取甲醇10μL（相當(dāng)于7.9mg）與丙酮100μL（相當(dāng)于79mg)，置于100mL容量瓶中，精密加0.1%(mL/mL）正丙醇（內(nèi)標(biāo)物質(zhì)）溶液20mL，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液；另取本品約0.16g，精密稱定，置于l0mL容量瓶中，精密加入上述內(nèi)標(biāo)溶液2mL，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取上述溶液，照氣相色譜法，按正丙醇計(jì)算的理論板數(shù)應(yīng)大于700。含丙酮不得過5.0%(g/g)，并不得出現(xiàn)甲醇峰。

1.2計(jì)算

按下式計(jì)算定量校正因子（f）和檢品中丙酮的含量：

定量校正因子（f)＝A丙醇/A丙酮×m丙酮/m丙醇

樣品中丙酮的百分含量=供試品中丙酮峰面積/供試品中正丙醇峰面積×fm丙醇/樣品取樣量/10×100%

式中A——峰面積，cm2;

m——質(zhì)量，g。

2.頂空氣相色譜法測(cè)定有機(jī)溶劑甲醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷

2.1溶液制備

(1）取甲醇100μL、乙腈30μL、二氯甲烷10μL、三氯甲烷10μL，分別加不含有機(jī)物的純水至100mL，作為定位溶液。

(2）另取上述同樣量有機(jī)溶劑，混合，加無有機(jī)物的水至100.0mL，作為有機(jī)殘留溶劑的限度試驗(yàn)對(duì)照溶液。取1mL對(duì)照溶液，加水至100.0ml,，測(cè)定有機(jī)溶劑的檢測(cè)限。

(3)取某藥物約0.3g，精密稱定，加3.0mL無有機(jī)物的水使溶解［如果樣品在水中不溶，可用適當(dāng)濃度的二甲基甲酰胺（DMF）水溶液溶解樣品］，作為供試品溶液。

 2.2分離度與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取定位溶液在上述色譜條件下測(cè)定，記錄色譜圖和保留時(shí)間。取對(duì)照溶液重復(fù)進(jìn)樣，計(jì)算各成分峰的分離度、柱效及色譜峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差。另取對(duì)照溶液的稀釋液進(jìn)樣，計(jì)算藥物中各有機(jī)溶劑的檢測(cè)限。參照下表格式記錄色譜參數(shù)：

 2.3計(jì)算含量

樣品測(cè)定取供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)樣，記錄色譜圖，外標(biāo)法計(jì)算含量。

注意事項(xiàng)

1.氣相色譜儀色譜柱的使用溫度。各種固定相均有zui高使用溫度的限制，為延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，在分離度達(dá)到要求的情況下盡可能選擇低的柱溫。開機(jī)時(shí)，要先通載氣，再升高汽化室、檢測(cè)室溫度和分析柱溫度，為使檢測(cè)室溫度始終高于分析柱溫度，可先加熱檢測(cè)室，待檢測(cè)室溫度近設(shè)定溫度時(shí)再升高分析柱溫度；關(guān)機(jī)前須先降溫，待柱溫降至50℃以下時(shí)，才可停止通載氣、關(guān)機(jī)。

2.進(jìn)樣操作。為獲得較好的氣相色譜儀分析精密度和色譜峰形狀，進(jìn)樣時(shí)速度要快而果斷，并且每次進(jìn)樣速度、留針時(shí)間應(yīng)保持一致。

3.檢測(cè)器的使用。為避免被測(cè)物冷凝在氣相色譜儀檢測(cè)器上而污染檢測(cè)器，檢測(cè)器的溫度必須高于柱溫30℃，并不得低于100℃。FID點(diǎn)火時(shí)應(yīng)關(guān)小空氣流量和開大H2流量，待點(diǎn)燃后，慢慢調(diào)整到工作比例，一般空氣與氫氣的流量比為10:1，載氣（N2）與H2的流量比為(1：1)-（(1：1.5)。用峰高定量時(shí)，需保持載氣流速恒定。